人髓过氧化物酶（MPO）ELISA Kit的实验原理与操作

人髓过氧化物酶（MPO）ELISA Kit的实验原理基于双抗体夹心法，通过特异性抗体与样品中的MPO结合，形成免疫复合物，从而定量检测MPO的含量。
实验操作步骤如下：
1. 首先，将纯化的人髓过氧化物酶（MPO）捕获抗体包被在微孔板上，制成固相抗体。
2. 然后，向包被的微孔中依次加入待测样品，使样品中的MPO与固相抗体发生特异性结合。
3. 接着，加入HRP标记的检测抗体，与已结合的MPO形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。
4. 经过彻底洗涤后，加入显色底物TMB，在HRP酶的催化下，TMB转化为蓝色，并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅与样品中MPO的浓度呈正相关。
5. 最后，使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的光密度，并根据标准曲线计算样品中MPO的浓度。
整个实验过程需要严格控制操作条件，如孵育时间、洗涤次数和洗涤时间等，以确保实验结果的准确性和可靠性。